当前位置:网站首页技术文章 > 上海金沙4066总区告诉大家:做明胶酶谱法实验的几个小贴士

上海金沙4066总区告诉大家:做明胶酶谱法实验的几个小贴士

更新时间:2015-06-23 点击量:1300

大家在用明胶酶谱法测定MMP2/9活性的时候,总是会遇到一些不同的问题,现在我们就把实验中的一下小贴士告诉大家,供大家参考。

1.做酶谱要测定样品蛋白的浓度(同Western blot,建议用BCA法);
2.酶谱法是测定样品中MMP-2、9活性的,如果煮沸使蛋白变性就没有用了,故禁忌煮沸;
3.上样缓冲液中也不能加β-巯基乙醇,这点由western blot转作明胶酶谱的朋友切记、切记;
4.蛋白上样量必须保证一样,不会出现一致的透明条带,如果不能保证上样量一致,测出的相对活性也没有统计分析的意义;
5.上样时zui重要的一点,必须在4℃环境中操作,我用的是冰台,同时所用的蛋白样品(-80℃冰箱)不能是以前曾解冻使用过的,必须是新取出的,因为只要解冻就会有部分酶降解,影响你的结果。此外做过一次酶谱的蛋白样品也不要反复使用,下次应使用其它已分装、未解冻过的样品;
6.电泳后的步骤很简单,液体别配错,照着方法做就可以了。

如果你曾做过Western blot,在这里恭喜你了,只要注意几个小细节,明胶酶谱对你非常简单。

上海金沙4066总区生物代理销售“基质金属蛋白酶MMP2/9明胶酶谱法试剂盒",如果你有任何疑问,欢迎随时咨询。

超声骨密度仪 | 天津智能科技 | 南京客控系统 |