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Western-blot实验代测在上样这一步的诸多注意事项

更新时间:2017-05-24 点击量:1253

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Western-blot实验代测在上样这一步的诸多注意事项!

上海金沙4066总区生物代做Western-blot,老师仅需提供样本即可,其他所有试剂均由我司提供,欢迎大家。

老师自己实验可在我司购买WB试剂盒,提供除抗体和膜之外的其他试剂,欢迎大家。

试剂盒组份如下:
试剂组分 包装规格
10*电泳液 100ml*1
10*电转液 100ml*1
10*TBST 100ml*1
2*上样缓冲液 1ml*1
PVDF膜(0.45um或者0.22um) 2张
显色A液 6ml*1
显色B液 6ml*1
BSA 5g*1
脱脂奶粉 5g*1
预染marker 20ul*1
二抗(抗鼠/抗兔/抗羊 可选) 50ul*1

 

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1 SDS-PAGE凝胶配置

样本处理

在收集的蛋白样品中加入适量浓缩的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液。100℃或沸水浴加热3-5分钟,以充分变性蛋白。

上样与电泳

冷却到室温后,把蛋白样品直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。为了便于观察电泳效果和转膜效果,以及判断蛋白分子量大小。

通常电泳时溴酚蓝到达胶的底端处附近即可停止电泳,或者可以根据预染蛋白质分子量标准的电泳情况,预计目的蛋白已经被适当分离后即可停止电泳。

上海金沙4066总区生物,专业做Western-blot实验,技术力量雄厚,确保您的每一份结果都真实可靠,欢迎大家!

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