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8-异前列腺素(8-iso-PG)elisa试剂盒是什么?

更新时间:2017-08-03 点击量:980

8-异前列腺素(8-iso-PG)elisa试剂盒基本信息简介

前列腺素(prostaglandinPG)是存在于动物和人体中的一类不饱和脂肪酸组成的、具有多种生理作用的活性物质。zui早发现它存在于人的中,当时以为这一物质是由前列腺释放的,因而定名为前列腺素。现已证明中的前列腺素主要来自精囊,全身许多组织细胞都能产生前列腺素。前列腺素在体内由花生四烯酸所合成,结构为一个五环和两条侧链构成的20碳不饱和脂肪酸。按其结构,前列腺素分为ABCDEFGHI等类型。不同类型的前列腺素具有不同的功能,如前列腺素E能舒张支气管平滑肌,降低通气阻力;而前列腺素F的作用则相反。前列腺素的半衰期极短(12分钟),除前列腺素I2外,其他的前列腺素经肺和肝迅速降解,故前列腺素不像典型的激素那样,通过循环影响远距离靶向组织的活动,而是在局部产生和释放,对产生前列腺素的细胞本身或对邻近细胞的生理活动发挥调节作用。前列腺素对内分泌、、消化、血液呼吸、心血管、泌尿及神经系统均有作用。分子式:C20H32O5 分子量:352.47 CAS 363-24-6

8-异前列腺素(8-iso-PG)elisa试剂盒实验条件简介

1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。

  (2 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH9.09.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4 1824小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.11.010μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为110μg/ml

  (3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。

4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMBABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。

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