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三磷酸腺苷ATP含量测定试剂盒真的太棒了!

更新时间:2018-03-13 点击量:930

三磷酸腺苷ATP含量测定试剂盒真的太棒了!

产品说明:

三磷酸腺苷(adenosine 5'-triphosphate,ATP)是生物体内能量转换zui基本的载体, 其含量的变 化直接关系到各器官的能量代谢。ATP 作为zui重要的能量分子在细胞的各种生理、病理过程中起着 重要作用。ATP 水平的改变,会影响许多细胞的功能。通常细胞在凋亡、坏死或处于一些毒性状态 下,ATP 水平会下降,而高葡萄糖刺激等对于一些细胞可以上调细胞内 ATP 水平。通常 ATP 水平 的下降表明线粒体的功能受损或下降,在细胞凋亡时 ATP 水平的下降通常和线粒体的膜电位下降同 时发生状态。ATP 含量测定试剂盒可以用于检测红细胞或组织内的 ATP 水平。

分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、台式离心机、研钵和蒸馏水。

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一、样本前处理:

1、红细胞:抗凝全血取下层积压红细胞,一般按 1:4 的体积比加双蒸水进行稀释,再混匀使溶血*,制备成溶血液。将制好的溶血液加入玻璃试管中沸水加热煮 10 分钟,取出混匀抽提 1 分钟, 4000 转/分钟,离心 10 分钟,取上清液待测。

2、组织样本:准确称取组织重,按质量(g):体积(mL)为 1:9 的比例加入 9 倍体积的沸双蒸水, 制成 10%的匀浆液,再置于沸水中煮 10min,取出混匀抽提 1min,3500 转/分钟,离心 10min, 取上清液待测。

3、培养细胞:先离心处理将细胞核培养上清分离,弃上清,得到下层沉淀细胞(一般细胞数量达 到 106 个),将收集好的细胞加入 300-500μL 的热双蒸水,置于热水浴(90-100℃)中匀浆破碎 后,将细胞悬液于沸水浴中加热 10min,取出混匀抽提 1min(涡旋混匀),即可用于测定。(如 果存在大块细胞碎片,需离心后取上清测定) 

注意:

1.要求不能有任何磷污染,建议用一次性塑料试管。

2.显色应用液配好后,不可放置太久,一般可保存 5 天,现配现用。

3.组织匀浆宜用 2%-5%浓度的匀浆上清,若样本浓度过高,则底色过深(对照管 OD 过高),需稀释 测定,一般通过预实验将对照 OD 值控制在 1.0 以下。

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