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带您了解琼脂糖凝胶4B
琼脂糖是线性的多聚物，基本结构是1,3连结的β-D-半乳糖和1,4连结的3,6-内醚-L-半乳糖交替连接起来的长链[1-2] 。琼脂果胶是由许多更小的分子组成的异质混合物。琼脂糖在水中一般加热到90℃以上溶解，温度下降到35-40℃时形成良好的半固体状的凝胶，这是它具有多种用途的主要特征和基础。琼脂糖凝胶性能通常用凝胶强度表示。强度越高，凝胶性能越好。
产品简介：
琼脂糖凝胶 4B 是用 4%浓度琼脂糖制备成的球型颗粒，作为凝胶层析介质使用。
本品为乳白色球状凝胶，无嗅、无味、无肉眼可见杂质。
操作方法：
本产品为传统的琼脂糖介质，非特异性吸附低，回收率高，可多次重复使用等特点，用于分子
量差异大、对分辨率要求不高的样品的凝胶层析纯化。
1. 装柱
凝胶过滤介质的使用对装柱的要求较高，为了保证分离效果，一般通过柱子上加一个装柱器来
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使分离柱装满凝胶，或采用带有轴向加压装置的柱子。凝胶柱床一般高于 60cm。装柱效果可用
染料或丙酮-水溶液进行检验。
以下过程为通用介质装填过程。若为带有轴向加压装置的柱子，可在柱床稳定后将柱床压紧，
接好管路。
(1) 让所有的材料和试剂达到室温。配制缓冲液。凝胶层析上样、平衡和洗脱只用一种低盐浓
度的缓冲液。
(2) 选择一根一定直径的柱子，长约 30~60cm，根据柱子大小取所需量的凝胶（约为柱床体积
的 1.15 倍），清洗掉 20%乙醇，抽干，用缓冲液（按凝胶：缓冲液=3：1 的比例）配成匀浆。
不要剧烈搅动，以免搅坏微球。
(3) 将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位（液面略高于滤膜），务必使底端无
气泡。
(4) 用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内，注意勿使产生气泡。打开柱子出液口，使
凝胶在柱内自由沉降，连结好柱子顶端柱头。
(5) 打开蠕动泵，让缓冲液缓慢流过，使柱床稳定。
(6) 用一个装柱器辅助装柱。装完后柱床上端轻轻刮平，上好柱头。
2. 平衡
让缓冲液以一定流速流过柱子，到流出液电导和 pH 不变。
3. 上样
(1) 样品用缓冲液配制，浑浊的样品要离心和过滤后上样。含盐量过大、浓度过小的样品要先
做处理，再上样。
(2) 介质对样品组分的分离是按组分分子量大小进行的，分子量大的先流出来。
(3) 上样体积约为柱体积的 1~2%，越小分离越好。
4. 洗脱
用缓冲液洗脱，洗脱中保持流速、缓冲液组成不变。
5. 再生
一般用缓冲液洗到平衡，可再次使用。
6. 注意
在装柱、使用和保存柱子的时候，始终要避免柱子流干气泡进入
保存：
产品应密封贮存在 4℃~25℃（保存溶液为 20%乙醇），通风、干燥、清洁的地方。不能冷冻。用过的柱子贮存在 4℃（20%乙醇）。本品应避免与氧化剂接触，避免长时间暴露在空气中。
保质期 ：5 年。
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