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土壤基因组DNA提取试剂盒提取的DNA可直接用于各种常规操作!

更新时间:2018-07-20 点击量:985

土壤基因组DNA提取试剂盒提取的DNA可直接用于各种常规操作!

 

产品简介:

本试剂盒适合于从褐土、淤泥、火山灰等各种土壤环境中提取微生物DNA。对土壤中各种细菌、真菌有很好裂解效果,大限度的保留了微生物DNA的多态性。
本试剂盒采用我公司*的腐殖质吸附材料,可专一的去除各种腐殖质成分而丝毫不会影响DNA的产率,纯度较酚、lv仿抽提法提高数倍。
使用本试剂盒提取的DNA产量大、完整性好,可直接用于各种常规操作,包括酶切、PCR 、文库构建、Southern 杂交等实验。

 

 

 

操作步骤:

使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

1、称取土壤样本0.1-0.5g,在液氮中充分研磨成细粉末,加入450ul 溶液A 震荡混匀。
* 也可直接称取样本 0.1-0.5g 于离心管(建议使用 2ml 圆底管),加入 450ul 溶液A 剧烈震荡混匀 1-2min 至没有固体块。 使用液氮研磨效果jia。

2、加入50ul 溶液B 充分颠倒混匀 (不要剧烈震荡),65℃水浴6min,每2min充分颠倒混匀一次。

3、加入100ul 溶液C 充分颠倒混匀 (不要剧烈震荡),12000rpm离心10min 。

4、将上清转移到新的离心管,12000rpm离心2min 。

5、在吸附柱中加入200ul 溶液D ,将离心后的上清加入到带有溶液D 的吸附柱中,用移液器吹吸几次混匀,12000rpm离心1min。

6、将收集管中的滤出液混匀后重新吸入吸附柱( 必须),12000rpm离心1min。

7、倒掉收集管中的废液,在吸附柱中加入漂洗液500ul,12000rpm 离心1min。

8、倒掉收集管中的废液,重复步骤7 两次(共漂洗三次)。

9、倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管,12000rpm 离心2min 。

10、拿出吸附柱在室温干燥数分钟( 因季节及气候等因素不等),或50℃干燥1min。

11、将吸附柱放入一个新的离心管中,加入50-100ul 洗脱液(65 ℃预热),12000rpm 离心1min。

12、将离心管中的液体重新加入到吸附柱中,12000rpm 离心1min。离心管中即为土壤微生物DNA 溶液。

13、若产物PCR 效果差,可以适当稀释DNA 产物,或添加1/10 体积的PCR 增强剂。

 

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