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植物电穿孔缓冲液的相关操作说明

更新时间:2019-05-20 点击量:1025

植物电穿孔缓冲液主要由PBS、甘露糖醇、氯化钙组成。主要用于植物电穿孔。规格为100ml,保存方式为4℃,6个月。
植物电穿孔缓冲液配制原理:
1.由弱酸HA及其盐NaA所组成的缓冲溶液对酸的缓冲作用,是由于溶液中存在足够量的碱A-的缘故。
2.当向这种溶液中加入一定量的强酸时,H+离子基本上被A-离子消耗;所以溶液的pH值几乎不变;当加入一定量强碱时,溶液中存在的弱酸HA消耗OH-离子而阻碍pH的变化。
3.在缓冲溶液中加入少量强酸或强碱,其溶液pH值变化不大,但若加入酸,碱的量多时,缓冲溶液就失去了它的缓冲作用。这说明它的缓冲能力是有一定限度的。

植物电穿孔缓冲液操作步骤:
1.小心切取植物材料,使其达到5mm的条状。植物材料置于原生质体溶液中温育,30℃ 旋转摇床3~6h,以便获得原生质体细胞; 
2.经80μm尼龙网过滤除去沉渣,流入15ml离心管。用4ml植物电穿孔缓冲液淋洗筛 网并收入离心管;
3.离心,弃上清;
4.用植物电穿孔缓冲液重复洗涤;
5.计数细胞,按1.5~2×106细胞/ml的密度将原生质体细胞重悬于植物电穿孔缓冲液中;
6.进行电穿孔转染。

植物电穿孔缓冲液配制原理注意事项:
1.注意无菌操作,避免微生物污染;
2.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套;
3.请严格按照产品说明书上的要求进行规范化的操作。

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