琼脂粉使用过程中常见的问题，金沙4066总区生物为您答疑解惑！

琼脂粉使用过程中常见的问题，金沙4066总区生物为您答疑解惑！

琼脂粉是由琼脂糖（agarose）和琼脂果胶（agaropectin）组成的，溶解性是琼脂粉不溶于冷水，易溶于沸水，缓溶于热水。检测凝胶强度为1.5%琼脂粉溶液在20摄氏度凝固后，能够表面不破承受的大压强是800-1200g/cm2 在生物学实验中，微生物培养基、植物组培培养基常规添加琼脂粉的用量1.5-2% （工作浓度6-25g/L）。当实验中遇到琼脂粉不凝固时，常规的检测方法时pH值，浓度，温度，充分混匀等情况。

说明：培养基的配制，工作浓度6-25g/L

用途：微生物培养基、植物培养基原材料，一般添加量1.5-2%
琼脂粉默认使用PH为中性， PH小于4则无法凝结，脂粉质检凝胶强度为1.5%浓度，800-1200g/cm2

常见问题解答：

一，生物实验中遇到培养基加入琼脂粉后，室温不凝固的原因分析：
1、培养基PH值过低 ，偏酸，水解，琼脂粉在PH值小于4则无法凝结。
2、所加琼脂粉质量不够 ，增加用量。搅拌不均匀，倒板前没有充分摇匀，凝固不均匀。
3、灭菌温度过高，加热时间过长。PH改变或破坏了琼脂的凝固度
4、培养基没有加热溶解充分，就没有凝固。

问题1：使用琼脂粉配置的MS培养基颜色明显变黄？影响实验？
产品批次不一样，有些批次的琼脂粉就是显黄色，不是质量问题，不影响使用。
进口产品也有直接指出琼脂粉是黄色为正常现象。

问题2：凝胶强度？
答：凝胶强度（1.5%）≥800g/cm2  800-1200g/cm2，根据不同批次会有不同数值。
1.5g琼脂粉溶于100ml水，溶解凝固后要放置20℃恒温箱中静置10小时以上，再测定凝胶强度。与温度，水质等有关。
一般琼脂粉和卡拉胶，夏季使用浓度要比冬季偏高。夏季温度高，保存时间久，可能会有部分降解，所以要达到同样凝胶强度的用量就偏高。

问题3：琼脂粉不凝固
1、培养基PH值过低 ，偏酸，水解
2、所加琼脂量不够 ，增加用量。搅拌不均匀，倒板前没有充分摇匀，凝固不均匀。
3、琼脂质量不过关，琼脂条在使用时添加量要稍微高一点，琼脂粉是不是新买的
4、灭菌温度过高，加热时间过长。PH改变或破坏了琼脂的凝固度
5、培养基没有加热溶解够不够，就没有凝固。是不是琼脂加错了，营养琼脂不会凝固。到平板时可以推荐在超净台内吹干晾干，蒸发过多水分。

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