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小鼠白细胞介素4(IL-4)ELISA试剂盒使用注意事项

更新时间:2023-06-26 点击量:391

小鼠白细胞介素4(IL-4)ELISA试剂盒使用注意事项


试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被小鼠白细胞介素4(IL-4)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并撤底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠白细胞介素4(IL-4)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
产品名称: 小鼠白细胞介素4(IL-4)ELISA检测试剂盒


产品规格:96T
储存条件: 2-8℃,避光防潮保存
有效期:6个月
本产品仅供科研实验用,不做其它用途!


实验步骤(仅供参考):

1.  从室温平衡60min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.  设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.  待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;
4.  随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.  弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。


注意事项:
1.  试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡60分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶玩全溶解后再使用。样本在使用前也要在室温平衡60分钟。
2.  实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3.  预处理后的样本无需稀释,直接取10μL加样即可。
4.  严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.  所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒性能:
<spantext-align: justify;="" line-height:="" 150%;"="">准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2.  灵敏度:zui低检测浓度小于1.0 pg/mL。
3.  特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4.重复性:板内变异系数小于10%、板间变异系数小于15%。


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