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人促黄体激素(LH)ELISA试剂盒,操作程序总结

更新时间:2014-07-04 点击量:1263

上海金沙4066总区生物代理销售“人促黄体激素(LH)ELISA试剂盒”,提供技术指导,提供售后服务,欢迎!*,7折优惠,赶紧抢购!

1.    标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀 释。

200ng/L

5 号标准品

150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液

100ng/L

4 号标准品

150µl 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

50ng/L

3 号标准品

150µl 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

25ng/L

2 号标准品

150µl 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

12.5ng/L

1 号标准品

150µl 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

 

 

 

2.    加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、 待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样  50µl,待测样品孔中先加样品稀释液  40µl

 


然后再加待测样品 10µl(样品zui终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽 量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.    温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。

4.    配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用

5.    洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置  30   秒后弃去,如此

重复 5 次,拍干。

6.    加酶:每孔加入酶标试剂  50µl,空白孔除外。

7.    温育:操作同 3

8.    洗涤:操作同 5

9.    显色:每孔先加入显色剂  A50µl,再加入显色剂  B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色

15 分钟.

10.  终止:每孔加终止液 50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11.  测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。

操作程序总结:

 

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