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上海金沙4066总区生物代理销售:土壤硝酸还原酶试剂盒,现货供应,7折*,欢迎!
土壤硝酸还原酶(Solid-Nitrate Reductase,S-NR)试剂盒说明书
测定意义
S-NR催化土壤中硝酸盐还原为亚硝酸盐,是土壤硝态氮还原的关键酶。研究S-NR的活性对合理施肥,降低氮素的损失具有重要意义。
测定原理
S-NR催化硝酸盐还原为亚硝酸盐,NO3ˉ +NADH+H+→ NO2ˉ +NAD+ +H 2 O;产生的亚硝酸盐能够在酸性条件下,与对–氨基苯磺酸及 α - 萘胺定量生成红色偶氮化合物;生成的红色偶氮化合物在 540 nm 有zui大吸收峰,可用分光光度法测定。
土壤硝酸还原酶试剂盒
需自备的仪器和用品
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制
试剂一:液体20mL×1瓶,-20℃保存。
试剂二:液体10mL×1瓶,-20℃保存。
试剂三:液体25mL×1瓶,4℃保存。
试剂四:液体25mL×1瓶,4℃保存。
试剂五:标准品储备液1mL,-20℃保存。
0.1mmol/L的NaNO2标准液的配制:用时将试剂五稀释100倍,即取 0.1ml 加蒸馏水定容至 10ml。
测定操作表
试剂名称 | 1mL带盖离心管 | |||
测定管 | 对照管 | 标准管 | 空白管 | |
风干土样(g) | 0.1 | 0.1 |
|
|
0.1mmol/LNaNO2(μL) |
|
| 100 |
|
双蒸水(μL) |
| 500 |
| 100 |
试剂一(μL) | 375 |
| 375 | 375 |
试剂二(μL) | 125 |
| 125 | 125 |
混匀后,盖盖后37℃水浴60min,8000g室温离心10min,取上清液
上清液(μL) | 400 | 400 | 400 | 400 |
试剂三(μL) | 250 | 250 | 250 | 250 |
试剂四(μL) | 250 | 250 | 250 | 250 |
混匀,显色20min后,4000g,室温离心10min,用蒸馏水调零,540nm下读取各管吸光值
注意事项
1、试剂一、试剂二和试剂五在冰上放置,用完立即放回-20℃。
2、标准管和空白管只需测一次。每个测定管设一个对照管。
S-NR活性计算:
单位的定义:24h每g土样中产生1μmol NO2ˉ的量为一个 S-NR活力单位。
S-NR(U/g)=标准品浓度(0.1mmol/L)×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)÷反应时间(1/24h)×反应总体积(0.5mL)÷样本质量(0.1g)=12×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)
土壤硝酸还原酶试剂盒
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