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三碘甲腺原氨酸(T3)放免试剂盒说明书
产品用途:
三碘甲状腺原氨酸(T3)和甲状腺素(T4),二者均为酪氨酸的碘化物,由甲状腺分泌。
其中 T4在外周脱碘后,约 2/5 转化为 T3(T3),3/5 转化为反 T3(r T3),这一过程
是在肝内完成的。肝细胞的微粒体和胞浆膜内存在碘化甲状腺素脱碘酶,其中 5ˊ-
脱碘酶催化 T4分解为高能的 T3, 5-脱碘酶催化 T4分解为无活性的 rT3。在肝细胞内,
甲状腺激素分布于细胞核、线粒体、微粒体和可溶性成分中,在这些部分中其含量水
平的高低变化依次为:可溶性成分﹥微粒体﹥线粒体﹥细胞核,且 T4﹥T3。肝脏是甲
状腺素代谢、灭活的主要场所,也是甲状腺素结合蛋白的合成部位,该结合蛋白可与
血清蛋白竞争性摄取甲状腺素,是肝脏摄取甲状腺素的主要因素。血清中,甲状腺素
绝大部分与蛋白质结合,仅极少部分呈游离型,游离型甲状腺素的多少与肝脏对甲状
腺素的摄取量成正比。肝硬化时,甲状腺素的代谢将必然受到影响。定量测定总 T3
含量,对评价甲状腺功能状态具有重要意义。
实验原理:
本品采用了第二抗体+聚乙二醇沉淀法放射免疫分析试验原理:含 T3的样品和 125I 标记
的 T3 与相应的抗体反应形成抗原抗体复合物。反应后加入二抗及 PEG,使免疫复合物
沉淀,离心,测沉淀物放射性强度。通过标准曲线得到样本中 T3的浓度。
实验方法:
1、将实验所需试剂及样本放置室温,平衡至少 30 分钟以上才可进行操作;
2、取 60X12mm 聚苯乙烯管进行编号,所有实验均做双管重复;
3、取每个浓度的标准品、质控血清和样本 50µl 加入相应编号的试管中;
4、每管均各加入 200µl 标记物工作液;
5、除去 T、NSB 管以外的各管均各加入 200µl 抗体工作液,充分混匀;
6、37℃温育 1.0 小时;
7、每管均各加入 500µl 分离剂后,充分混匀;
8、室温放置 10~15 分钟后,离心 3500 转/分,20 分钟后,吸去或倾倒掉上清液;
9、用 γ-计数器测定各管放射性计数(CPM)。 推荐检测时间: 1 分钟
10、从标准曲线上读取样本及质控血清的浓度
三碘甲腺原氨酸(T3)放免试剂盒说明书