产品列表 / products
溴化氰活化4B/6B琼脂糖凝胶是一种活化中间体填料,它是通过溴化氰和琼脂糖上面的羟基反应生成活化的氰酸酯基团。蛋白质、多肽、氨基酸等可以偶联到溴化氰活化4B/6B琼脂糖凝胶上。
它具有以下优点:
偶联条件温和,效率高;可偶联含有氨基的配体,应用范围广。
产品指标
产品牌号 | 溴化氰活化4B琼脂糖凝胶 | 溴化氰活化6B琼脂糖凝胶 |
基质 | seplite 4B | seplite 6B |
颗粒大小 | 平均粒径90μm(50-160μm) | |
偶联能力 | 20~60mgα-胰凝乳蛋白酶原/ml凝胶 | |
大线性流量 | 75cm/h(25℃),直径1.6cm色谱柱,5cm柱床高 | |
高温高压 | 不耐受 | |
pH稳定性 | 2–11 | |
化学稳定性 | 常见溶液中可以保持稳定。可以耐受非离子型去污剂、变性溶剂,如8 M尿素和6 M盐酸胍。也可以耐受50%二甲基甲酰胺和50%二氧六环等有机溶剂。 | |
保存 | 冻干粉,2~8℃,干燥 |
使用注意事项:
溴化氰活化4B/6B琼脂糖凝胶是以添加剂的形式冻干处理得到的。这些添加剂在填料螯合所需的配体前必须在低pH(pH 2–3)条件下进行清洗。活化后的活性基团也应该使用低pH值(pH值2–3)保存,而在高pH值则会出现降解。
称取所需量的冻干粉(1 g冻干粉可获得3~5ml终体积的填料),使用1mM HCl溶胀。填料会很快膨胀,再用1mM HCl在玻璃砂芯漏斗(G3)中进行清洗15min。每克冻干粉添加约200ml 1mM的HCl溶胀,实际可以分次添加。
一般配体偶联的过程如下:
(1)将所需要偶联的配基溶解到 pH 8.3含有0.5mol/LNaCl的0.1mol/LNaHCO3 缓冲溶液中,加入溶胀好的溴化氰活化4B/6B琼脂糖凝胶。
(2)在室温中搅拌反应2~4小时或者在4℃下过夜反应。
(3)反应*后,用5倍反应体积的偶联缓冲液洗涤掉其中多余的配体,10倍体积的水洗。
(4)将反应完洗涤过的凝胶悬浮到水中,加入乙醇胺(1mol/L)或者pH8.0的Tris-HCl缓冲液,在常温少搅拌反应2小时,以消除残余活性基团。
(5)用含有0.5mol/LNaCl的0.1mol/L醋酸盐缓冲液(PH 4.0)和含有0.5mol/LNaCl的0.1mol/L Tris-HCl缓冲液(PH 8)交替洗涤,至少重复以上循环洗涤3次。用10倍柱体积的PBS洗涤。