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金沙4066总区生物告诉大家:ELISA实验中如何使用拟合曲线

更新时间:2016-01-08 点击量:1709

方法:

1、拟和曲线:

输入*行:浓度值,如

输入第二行:该浓度下的调整后的od值,如00.5861.3971.9973.42

选择这些输入的数据,用插入里的图表按钮,进入图表向导,在“标准类型"中选择“xy散点图";在“子图表类型"中选择“折线散点图",按“下一步";选择“系列产生在行",按“下一步";数据标志,可以填写:如数据y轴,OD值;数据x轴,浓度;按下一步,点击完成。可得曲线图。

单击曲线,按右键,选择“添加趋势线",在类型中,选择多项式;在选项中,选择显示公式,选择显示R平方值。

得到公式和R平方值。

也可以用上面说的方法:双击图表,把它输入到图表的数据中,就可以拟和曲线。

2、计算浓度:

*次实验:

标准曲线为:

y=-4E-05x2+0.026x

R2=0.9745

为例,已知OD值,计算浓度。

由于y=-4E-05x2+0.026x,所以可以得到:

4E-05x2-0.026x+y=0

ax2+bx+y=0

a=4E-05;b=-0.026;

x=(-b-(b*b-4ay)(平方根))/(2*a)

代入a,b,和y值,得

x=(0.026-(0.026*0.026-0.00016*y)(平方根))/(2*0.00004)

在excel里可以用以下公式表示:

x=(0.026-EXP(LN(0.026*0.026-0.00016*y)/2))/(2*0.00004)


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通用公式为:

x=(-b-EXP(LN(b*b-4ay)/2))/(2*a)

您可以应用excel的公式拷贝功能,计算所有浓度

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