人胚肺成纤维细胞-仅供科研

人胚肺成纤维细胞-仅供科研

培养基 EMEM完-全培养基：90%EMEM+10%FBS 

传代方法 复苏步骤：①冻存管从液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中，迅速没入37℃水浴锅，摇晃冻存管加速溶解，以1min内全部溶解为宜；②在超净台中将溶解好的细胞液加入到装有9mL完-全培养基的离心管内，1000-1200rpm离心5min，弃去上清液，用1-2mL完-全培养基重悬细胞。③将细胞悬液加入到含有5-6mL完-全培养基的T25瓶中，放入培养箱培养。

细胞传代：①将旧培养液吸除，PBS清洗两遍后，加入1-2mL胰-酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；②镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（可用吸管吸起些许胰-酶轻轻吹打细胞层某处，肉眼可见细胞层脱落，即消化完成，否则继续消化），直接吸掉胰-酶，加入5-6mL完-全培养基，轻轻吹打细胞层，把细胞层吹落，吹散。③将细胞悬液按1:2比例分到新的T25瓶中，添加适当的完-全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。；④注意培养基pH值变化和细胞密度，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%-90%时，重复传代操作或者冻存。 

生长条件 37℃；5%CO2+95%空气； 

生长特性 贴壁生长 

存储条件 液氮 

类型 贴壁生长 

安全等级 1 

形态 成纤维细胞样，长梭形，边缘不规则，单层贴壁生长，背景干净 

分离基物 MRC-5细胞系来自14周龄男性胎儿的正常肺组织，该细胞老化前能传代42到46次群体倍增。 它是正常二倍体细胞系，46，XY核型。 模式染色体数为46，概率为70%。