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科研试剂-人牙龈成纤维细胞
培养基90%DMEM-H+10%FBS
传代方法复苏步骤:①冻存管从液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中,迅速没入37℃水浴锅,摇晃冻存管加速溶解,以1min内全部溶解为宜;②在超净台中将溶解好的细胞液加入到装有9mL完-全培养基的离心管内,1000-1200rpm离心5min,弃去上清液,用1-2mL完-全培养基重悬细胞。③将细胞悬液加入到含有5-6mL完-全培养基的T25瓶中,放入培养箱培养。
细胞传代:①将旧培养液吸除,PBS清洗两遍后,加入1-2mL胰-酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);②镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(可用吸管吸起些许胰-酶轻轻吹打细胞层某处,肉眼可见细胞层脱落,即消化完成,否则继续消化),直接吸掉胰-酶,加入5-6mL完-全培养基,轻轻吹打细胞层,把细胞层吹落,吹散。③将细胞悬液按1:2比例分到新的T25瓶中,添加适当的完-全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。;④注意培养基pH值变化和细胞密度,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%-90%时,重复传代操作或者冻存。
生长条件37℃;5%CO2+95%空气;
生长特性贴壁生长
存储条件液氮
安全等级1
形态成纤维细胞样,长梭形,多角形,边缘不规则,单层贴壁生长,背景干净,无空泡
分离基物牙龈
应用领域人牙龈成纤维细胞 (hGF) 有可能成为用于再生医学研究的间充质干细胞 (MSC) 的替代来源,因为它们具有相似的形态、CD 标记和分化谱系。
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