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蔗糖磷酸合成酶(SPS)生化试剂盒迎*,欢迎抢购

更新时间:2014-09-18 点击量:2411
产品名称:
产品编号:RY6-2
检测方法:酶标法
产品规格:100管/96样
运输:快递送货上门
应用范围:科研用检测试剂

 

 

 

 

 

 

 

       蔗糖合成酶(Sucrose synthaseSS试剂盒说明书

                                          酶标法100/96

测定意义

  蔗糖是源(叶片等)光合产物向“库”器官运输的主要形态。SSEC 2.4.1.13催化植物体内游离果糖和葡萄糖合成蔗糖

测定原理

SS催化游离果糖与葡萄糖供体UDPG反应生成蔗糖,蔗糖与间苯二酚反应可呈现颜色变化,在480nm下有特征吸收峰,酶活力大小与颜色的深浅成正比。

需自备的仪器和用品

酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、酶标板、研钵、冰、蒸馏水

试剂的组成和配制

提取液液体60mL×1瓶,4保存;

试剂一:液体10mL×1瓶,-20保存;

试剂二:1mg/mL蔗糖溶液10mL×1瓶,4保存;

试剂三:液体5mL×1瓶,4保存

试剂四:液体40mL×1瓶,4保存;

试剂五:液体10mL×1瓶,4保存;

样品测定的准备:

称取约0.05g组织加入0.5mL提取液,冰浴中匀浆。8000g 4离心10min,取上清,置冰上待测。

 

测定步骤

试剂名称μL

测定管

标准管

试剂一

75

75

 样本

15

 

试剂二

 

15

混匀,25准确水浴10min

 试剂三

25

25

沸水浴中煮沸10min左右(盖紧,以防止水分散失),冷却

试剂四

350

350

试剂五

100

100

混匀,80水浴保温10min,冷却后,取200μL至酶标板中480nm下测定吸光值。

SS活性计算

1、按照蛋白浓度计算

单位的定义:每mg组织蛋白在反应体系中每分钟催化产生1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。

SS活性(U/mg prot=A测定管÷A标准管×1mg/mL÷蛋白浓度(mg/mL) ×100

2、按照样本鲜重计算

单位的定义:每g组织在反应体系中每分钟催化产生1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。

SS活性(U/g鲜重)=A测定管吸光度÷A标准管×1mg/mL÷样本鲜重(g/mL) ×100

 

 

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