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上海金沙4066总区生物代理销售人白介素10(IL-10)elisa 试剂盒,现货供应,7折*,欢迎。
实验操作过程
1、计算使用微孔的数量,包括要检测的样品、标准品、对照所用的微孔,每一个样品、标准品、空白对照应该做两个孔,一式两份。
2、预洗板,每个微孔用400μl的wash buffer清洗,清洗2遍,每次用时10-15秒。zui后一遍清洗完后要清空微孔,微孔板放在吸水纸上的时间不能超过15分钟,不要让微孔干燥,清洗完后立即使用。 3、标准品在微孔上稀释,加100μl Sample Diluent至S1—77个标准空中,吸取100μl准备好的标准品放到S1中,混匀后吸取100μl放到S2中,混匀后吸取100μl放到S3中。。。。。依次到S7,吸取S7中100μl液体弃去,保证每个微孔都是100μl。注意在加液体过程中不要碰到微孔的内壁。 4、加100μl Sample Diluent至空白对照孔,一式两份。 5、加50μl Sample Diluent至每个样品孔中 6、加50μl 准备好的血清样品至每个样品孔中
7、用黏膜覆盖后在室温下放在微盘震荡机上孵育2小时,设置100rpm。 8、准备Biotin-conjugate
9、2小时后去掉微孔板上的黏膜,清空液体,每个微孔用400μl的wash buffer清洗,每空清洗4遍后进行下一步。
10、加100μlBiotin-conjugate至所有微孔
11、用黏膜覆盖后在室温下放在微盘震荡机上孵育1小时,设置100rpm。 12、准备Streptavidin-HRP
13、1小时后去掉微孔板上的黏膜,清空液体,每个微孔用400μl的wash buffer清洗,每空清洗4遍后进行下一步。
14、加100μlStreptavidin-HRP至所有微孔,包括空白对照孔。
15、用黏膜覆盖后在室温下放在微盘震荡机上孵育1小时,设置100rpm。
16、1小时后去掉微孔板上的黏膜,清空液体,每个微孔用400μl的wash buffer清洗,每空清洗4遍后进行下一步。
17、加100μl TMB Substrate Solution 至所有微孔。
18、室温下18--25℃孵育10分钟,避免直接暴露在强光下。当浓度zui高的标准品的微孔颜色变成深蓝色时,加终止液(the stop solution)或者S1的标准孔在620nm的OD值达到0.9-0,95
19、每个微孔加100μl stop solution终止酶的反应,必须迅速而且*的加入到每个微孔以能*使酶失活。结果应在终止液加入后立即读取,或者,如果微孔板要放在2--8℃的暗处存放,可以再1小时内读结果。
20、测量每个微孔板的光度值,选择450nm(备选620nm)
人白介素10(IL-10)elisa 试剂盒
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